domingo, 15 de noviembre de 2015

PCR EN INFARTO AGUDO DE MIOCARDIO

Asociación entre el polimorfismo 4G/5G en el gen del inhibidor del activador del plasminógeno-1 (PAI-1) y el infarto agudo de miocardio con elevación del ST en pacientes jóvenes.

OBJETIVO: Determinar la participación del polimorfismo 4G/5G en el gen del inhibidor del activador del plasminógeno tipo 1 (PAI-1) en pacientes con infarto agudo de miocardio con elevación del segmento ST y edad ≤ 45 años y su influencia en la regulación de la concentración plasmática de PAI-1.

MUESTRA: Sangre periférica

TIPO DE ÁCIDO NUCLEICO: ADN genómico

EXTRACCIÓN: QIAamp DNA Blood mini kit

TÉCNICA: Amplificación con PCR

PROCESO: Desnaturalización inicial a 94 °C por 3 min, seguido por 30 ciclos.
  • Desnaturalización a 94 °C de 30 s,
  • Alineación a 60 por 30 s,
  • Extensión a 72 °C por 30 s,
Extensión lineal por 1 min a 72 °C

VISUALIZACIÓN: EFO con gel de agarosa

RESULTADO: Se obtuvo un producto amplificado de 99 pb (5G) y 98 pb (4G). El producto fue restringido mediante la adición de 1 U de la enzima específica Bsl I a 25 µl del producto amplificado e incubado a 55 °C para asegurar su completa restricción.


Bibliografía:

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